在室溫中
植物ELISA檢測試劑盒操作的流程事項
植物ELISA檢測試劑盒操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。除空白孔外，余孔分別加標準溶液或待測樣品100ul，注意不要有氣泡，輕輕混勻，酶標板加上蓋，37℃反應(yīng)120分鐘。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。
3.每孔加檢測溶液A工作液100ul，37℃,60分鐘。洗板3次，350ul/每孔，甩干。
4.每孔加檢測溶液B工作液100ul，37℃，60分鐘，洗板5次，甩干。
5.依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光顯色30分鐘(此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯)。
6.依序每孔加終止溶液50ul，終止反應(yīng)(此時蘭色立轉(zhuǎn)黃色)。用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
植物ELISA檢測試劑盒注意事項：
1．洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
2．一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
3．請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。
4．如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
5．在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
6．底物請避光保存。
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