豬ELISA檢測試劑盒在實驗中一定要多注意以下事項

發布時間：2020-06-26 點擊次數：2624次

　　豬ELISA檢測試劑盒的實驗原理：

　　用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

　　豬ELISA檢測試劑盒的樣品收集、處理及保存方法：

　　1、血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，10×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

　　2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

　　3、細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

　　5、保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

　　注意事項：

　　1、嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

　　2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

　　3、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

　　4、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。

　　5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。